專利名稱：補(bǔ)血中藥制劑及其生產(chǎn)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種具有補(bǔ)血、升高白細(xì)胞、促進(jìn)造血系統(tǒng)功能改善的中藥制劑及其生產(chǎn)方法。
背景技術(shù)：
貧血是指外周血中的單位容積內(nèi)血紅蛋白濃度(Hb)紅細(xì)胞計(jì)數(shù)(RBC)和(或)血細(xì)胞比容(HCT)，低于相同年齡、性別和地區(qū)的正常標(biāo)準(zhǔn)。貧血的病因很多，主要有造血原料缺乏、骨髓造血不良、血液系統(tǒng)其他疾病、紅細(xì)胞破壞過多、失血性貧血、其他慢性疾病等?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)的一些療法如放療、化療，亦可引起貧血。
雞血藤是一種沿用千年的行血補(bǔ)血，舒筋活絡(luò)中藥，其性溫、味苦、微甘，歸肝、腎經(jīng)，有活血、補(bǔ)血、通絡(luò)等功效。《本草綱目拾遺》認(rèn)為雞血藤“大補(bǔ)氣血，與老人婦女更為得益……統(tǒng)治百病，能生血、和血、補(bǔ)血、破血；又能通七竅，走五臟，宣筋絡(luò)”，《飲片新參》謂其可“去瘀血、生新血、流利經(jīng)脈”。臨床上常用于治療月經(jīng)不調(diào)、血虛萎黃、麻木癱瘓、風(fēng)濕痹痛等病癥，近年來也用來治療各種原因引起的白細(xì)胞、紅細(xì)胞等全血象減少和再生障礙性貧血等疾病。從公開文獻(xiàn)中我們檢索到一些有關(guān)雞血藤治療貧血的內(nèi)容有以下一些1、蘇爾云，陳輝樹.雞血藤復(fù)方治療再生障礙性貧血臨床觀察[J].中國中西醫(yī)結(jié)合雜志，1997，17(4)213。2、梁耀君，胡冀.雞血藤防治腫瘤化療后白細(xì)胞減少的臨床研究[J].遼寧中醫(yī)雜志，1998，25(5)227。3、許寶麗，許志誠.雞血藤湯治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎30例[J].包頭醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，1997，13(2)58。雞血藤是廣西的道地藥材，產(chǎn)銷量占全國的90％以上。雞血藤的成分很多，黃酮類是其活性成分之一。市面上有許多以雞血藤為原料的補(bǔ)血藥，但雞血藤總黃酮未見有報(bào)道。傳統(tǒng)的雞血藤提取液口感差，攜帶不便，不易儲(chǔ)存，影響了其療效及其應(yīng)用。開發(fā)中藥有效部位，提高對作用靶點(diǎn)的生物利用度，以滿足治療需要，是中藥新藥開發(fā)中的重要問題。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供一種具有補(bǔ)血作用的中藥制劑，由雞血藤提取物及輔料組成。其中具有補(bǔ)血作用的成分為雞血藤總黃酮，輔料只起賦形、防腐、賦香、矯味等作用。
本發(fā)明的中藥制劑的成分和重量百分含量如下(以干物質(zhì)計(jì)) 雞血藤總黃酮 0.01-100％ 輔料 0-99.99％ 雞血藤的品種很多，《中國藥典》2005年版規(guī)定雞血藤原植物為密花豆Spatholobussuberectus Dunn，主要分布在廣西、廣東。密花豆是多年生豆科木本植物，為廣西道地藥材。
本發(fā)明的目的是提供一種針對貧血和白細(xì)胞減少癥，具有補(bǔ)血、升白，促進(jìn)造血系統(tǒng)功能改善的雞血藤總黃酮化合物。
本發(fā)明的藥理實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，以雞血藤總黃酮制成的中藥制劑，應(yīng)用于血虛動(dòng)物模型，顯示有良好的補(bǔ)血效果。
本發(fā)明的技術(shù)路線如下雞血藤一定濃度醇類溶液回流提取，回收溶劑，濃縮至成稠膏。稠膏經(jīng)過水溶解，抽濾處理，成樣品液。上大孔樹脂，用一定濃度醇類溶液洗脫，TLC檢識，收集洗脫液。濃縮、干燥得雞血藤總黃酮，總黃酮與輔料混合、壓制或調(diào)配成產(chǎn)品。
本發(fā)明的實(shí)質(zhì)性特點(diǎn)和顯著的進(jìn)步 1.本發(fā)明采用了大孔樹脂方法，純化雞血藤提取物得到總黃酮。該工藝簡單、成本低，有利于工業(yè)化生產(chǎn)。
2.市面上有許多以雞血藤為原料的補(bǔ)血藥，但雞血藤總黃酮未見有報(bào)道。
具體實(shí)施例方式 一、制備雞血藤總黃酮
具體實(shí)施例方式 下列實(shí)施例子用于舉例說明本發(fā)明，并不是對本發(fā)明保護(hù)范圍的任何限制。
實(shí)施例1 把裝有100g雞血藤粗粉與1000ml濃度為70％的乙醇浸泡0.5h，回流提取2h，倒出上清過濾。再加入800ml濃度為70％的乙醇回流提取1h，合并濾液。減壓回收乙醇，將提取液置于蒸發(fā)皿中揮發(fā)至無醇味，用10倍體積水溶解，抽濾后，上大孔樹脂。用蒸餾水洗至幾乎無色，用30％乙醇液洗脫，TLC檢識。合并洗脫液，蒸發(fā)至浸膏狀。真空烤箱50～60℃干燥2～3h，得到雞血藤總黃酮。
實(shí)施例2 把裝有100g雞血藤粗粉與1000ml濃度為50％的甲醇浸泡0.5h，回流提取2h，倒出上清過濾。再加入800ml濃度為50％的甲醇回流提取1h，合并濾液。減壓回收甲醇，將提取液置于蒸發(fā)皿中揮發(fā)至無醇味，用10倍體積水溶解，抽濾后，上大孔樹脂。用蒸餾水洗至幾乎無色，用40％甲醇液洗脫，TLC檢識。合并洗脫液，蒸發(fā)至浸膏狀。真空烤箱50～60℃干燥2～3h，得到雞血藤總黃酮。
實(shí)施例3 把裝有100g雞血藤粗粉與1000ml濃度為60％的丙醇浸泡0.5h，回流提取2h，倒出上清過濾。再加入800ml濃度為60％的丙醇回流提取1h，合并濾液。減壓回收乙醇，將提取液置于蒸發(fā)皿中揮發(fā)至無醇味，用10倍體積水溶解，抽濾后，上大孔樹脂。用蒸餾水洗至幾乎無色，用50％丙醇液洗脫，TLC檢識。合并洗脫液，蒸發(fā)至浸膏狀。真空烤箱50～60℃干燥2～3h，得到雞血藤總黃酮。
實(shí)施例4 把裝有100g雞血藤粗粉與1000ml濃度為80％的乙醇浸泡0.5h，回流提取2h，倒出上清過濾。再加入800ml濃度為80％的乙醇回流提取1h，合并濾液。減壓回收乙醇，將提取液置于蒸發(fā)皿中揮發(fā)至無醇味，用10倍體積水溶解，抽濾后，上大孔樹脂。用蒸餾水洗至幾乎無色，用60％乙醇液洗脫，TLC檢識。合并洗脫液，蒸發(fā)至浸膏狀。真空烤箱50～60℃干燥2～3h，得到雞血藤總黃酮。
實(shí)施例5 把裝有100g雞血藤粗粉與1000ml濃度為90％的乙醇浸泡0.5h，回流提取2h，倒出上清過濾。再加入800ml濃度為90％的乙醇回流提取1h，合并濾液。減壓回收乙醇，將提取液置于蒸發(fā)皿中揮發(fā)至無醇味，用10倍體積水溶解，抽濾后，上大孔樹脂。用蒸餾水洗至幾乎無色，用70％乙醇液洗脫，TLC檢識。合并洗脫液，蒸發(fā)至浸膏狀。真空烤箱50～60℃干燥2～3h，得到雞血藤總黃酮。
二、補(bǔ)血中藥制劑
具體實(shí)施例方式 下列實(shí)施例子用于舉例說明本發(fā)明，并不是對本發(fā)明保護(hù)范圍的任何限制。
實(shí)施例1 提取實(shí)例1所得雞血藤總黃酮，加入2倍量的白糖細(xì)粉，用70％酒精濕潤，制成顆粒，分裝，即得雞血藤總黃酮顆粒劑。
實(shí)施例2 提取實(shí)例2所得雞血藤總黃酮，加入適量淀粉和滑石粉，用70％酒精濕潤，制成顆粒，用壓片機(jī)壓片，即得雞血藤總黃酮片。
實(shí)施例3 提取實(shí)例3所得雞血藤總黃酮，加入適量結(jié)晶山梨醇，制成口含片。
實(shí)施例4 提取實(shí)例4所得雞血藤總黃酮，與單硬脂酸甘油酯加熱熔融混勻后，滴入不相混溶的冷凝液中，收縮冷凝制成球形，制成滴丸。
實(shí)施例5 提取實(shí)5所得雞血藤總黃酮，干燥、粉碎，加入輔料適量，混勻，分裝在空心膠囊或密封于軟質(zhì)囊材中，制成膠囊。
雞血藤總黃酮藥效學(xué)作用試驗(yàn) 1實(shí)驗(yàn)材料與儀器 1.1藥品與試劑 雞血藤總黃酮，鄧家剛提供；鹽酸苯肼(PHH)，上海元越化工有限公司，批號20051030；阿膠，山東東阿阿膠股份有限公司生產(chǎn)，批號20040730；環(huán)磷酰胺(CTX)，上海華聯(lián)制藥有限公司生產(chǎn)，批號20050914。
1.2動(dòng)物昆明種小鼠，(清潔級)，由廣西醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，動(dòng)物合格證號SCXK桂2003-0003。
1.3儀器血球計(jì)數(shù)儀(sysmex KX-21型)、吉爾森微量取樣器(法國Pipetman公司)、鈷60放射源(加拿大Nurdion公司) 1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理使用SPSS10.0分析系統(tǒng)，數(shù)據(jù)以
表示，組間差異用t檢驗(yàn)。
2方法和結(jié)果 2.1雞血藤總黃酮對CTX所致小鼠骨髓抑制模型的影響[1] 取小鼠60只，體重18～22g，雌雄(♀♂)兼用，隨機(jī)分為6組(空白對照組、模型組、阿膠組、高劑量、中劑量、低劑量組)，以上各組i.g.給藥，qd×8d，給藥容量為0.2ml/10g，空白對照組、模型組i.g.蒸餾水。造血虛模型除空白對照組外，給藥后第3、4天i..p環(huán)磷酰胺(100mg/kg)，第8天藥后1h分別取血進(jìn)行外周血計(jì)數(shù)及有核細(xì)胞(BMNC)計(jì)數(shù)小鼠脫臼處死，取右側(cè)完整股骨，除凈軟組織，用3％醋酸液5ml沖出全部骨髓，過4號針頭，使成單細(xì)胞懸液，顯微鏡下計(jì)數(shù)BMNC，結(jié)果見表1 表1 STF對CTX所致小鼠骨髓抑制模型WBC和BMNC的影響(
n＝10) 注與空白對照組比較，①表示P＜0.05；②P＜0.01；與模型組比較，③表示P＜0.05；④P＜0.01。(下同) 結(jié)果表明各組劑量藥物對貧血小鼠WBC和BMNC的下降有拮抗作用，與模型組對比有顯著差異。
2.2STF對PHH所致小鼠血虛模型的影響[1] 取小鼠60只，體重18～22g，雌雄(♀♂)兼用，隨機(jī)分為6組(空白對照組、模型組、阿膠組、高劑量、中劑量、低劑量組)，以上各組ig給藥，qd×8d，給藥容量為0.2ml/10g，空白對照組、模型組i.g.蒸餾水。造血虛模型除空白對照組組外，給藥后第2天s.c.PHH(20mg/kg)、第4天s.c.PHH(40mg/kg)，第4、5、6、7天i.p.CTX(40mg/kg)，第8天末次給藥后1小時(shí)，取血進(jìn)行RBC、HGB、HCT計(jì)數(shù)，結(jié)果見表2。
表2 STF對PHH所致小鼠血虛模型的影響(
n＝10) 結(jié)果表明各組劑量藥物對血虛動(dòng)物RBC、HGB、HCT的下降有拮抗作用，與模型組對比有顯著差異。
2.3STF對CTX所致小鼠白細(xì)胞減少模型的影響[3] 取小鼠60只，體重18～22g，雌雄(♀♂)兼用，隨機(jī)分為6組(空白對照組、模型組、阿膠組、高劑量、中劑量、低劑量組)，以上各組ig給藥，qd×8d，給藥容量為0.2ml/10g，空白對照組、模型組i.g.蒸餾水。造血虛模型除空白對照組組外，給藥后第2、3天i.p.CTX(100mg/kg)，第4、6、8天給藥后1h分別取血進(jìn)行WBC計(jì)數(shù)，結(jié)果見表3。
表3 STF對CTX所致小鼠白細(xì)胞減少模型的影響(
n＝10)單位(×109/L) 結(jié)果表明各組劑量藥物(除第5d小劑量組外)對小鼠WBC的下降有拮抗作用，與模型組對比有顯著差異。
2.4STF對鈷60所致小鼠血虛模型的影響[4] 取小鼠60只，體重18～22g，雌雄(♀♂)兼用，隨機(jī)分為6組(空白對照組、模型組、阿膠組、高劑量、中劑量、低劑量組)，以上各組i.g.給藥，qd×14d，給藥容量為0.2ml/10g，空白對照組、模型組i.g.蒸餾水。造血虛模型除空白對照組外，給藥后第6天照射鈷60(照射劑量為3GY，源距0.7m，照射時(shí)間3分30秒)，造模后第3、7、14、21、30天分別取血進(jìn)行WBC、RBC計(jì)數(shù)，結(jié)果見表4、5。
表4 STF對鈷60照射小鼠WBC減少的影響(
n＝10)單位(×109/L) 結(jié)果表明STF高劑量及模型組于鈷60照射后7、14、21、30天，低劑量組、中劑量組于鈷60照射后第7、14、21天，WBC明顯高于照射模型組，差異有顯著性，提示STF對鈷60照射后小鼠WBC下降有拮抗作用。
表5 STF對鈷60照射小鼠RBC減少的影響(
n＝10)單位(×1012/L) 結(jié)果表明STF各劑量組及模型組于鈷60照射后7、14天，RBC明顯高于照射模型組，差異有顯著性，提示STF對鈷60照射后小鼠RBC下降有拮抗作用。
2.5STF對失血性小鼠血虛模型的影響[4] 取小鼠60只，體重18～22g，雌雄(♀♂)兼用，隨機(jī)分為6組(空白對照組、模型組、阿膠組、高劑量、中劑量、低劑量組)，以上各組ig給藥，qd×7d，給藥容量為0.2ml/10g，空白對照組、模型組i.g.蒸餾水。6組動(dòng)物先測造血虛模型前的RBC、HGB值。除空白對照組外，其余5組均眼球后靜脈叢放血(5滴/10g體重)造成血虛模型，連續(xù)3天。第7天測定小鼠血液RBC、HGB值。與模型組比較，作組間t檢驗(yàn)，結(jié)果見表6、7。
表6 STF對失血性小鼠血虛模型RBC的影響(
n＝10)單位(×1012/L) 結(jié)果表明各組劑量藥物對失血性貧血小鼠RBC的下降有拮抗作用，與模型組對比有顯著差異。
表7 STF對失血性小鼠血虛模型HGB的影響(
n＝10)單位(×g/L) 結(jié)果表明各組劑量藥物對失血性貧血小鼠HGB的下降有拮抗作用，與模型組對比有顯著差異。
3結(jié)論 雞血藤總黃酮具有促進(jìn)血虛模型小鼠造血功能恢復(fù)的作用。
權(quán)利要求
1.一種具有補(bǔ)血作用的中藥制劑，由雞血藤提取的雞血藤總黃酮及輔料組成。其重量百分比如下
雞血藤總黃酮 0.05-100％
輔料 0-99.99％
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的雞血藤總黃酮，是指從密花豆Spatholobussuberectus Dunn提取，主要由表兒茶素等黃酮類化合物組成。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的補(bǔ)血中藥制劑，輔料是從國際或我國藥品監(jiān)督管理部門認(rèn)可的藥用輔料中選用。輔料起賦形、賦香、防腐、填充等作用。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的雞血藤總黃酮的生產(chǎn)方法，其特征在于工藝流程為雞血藤→打粉→醇類溶液提取→提取液上大孔樹脂柱→收集洗脫液→濃縮→雞血藤總黃酮。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的補(bǔ)血中藥制劑，生產(chǎn)工藝采用慣常的、通用的制藥工藝完成，工藝包括從雞血藤提取雞血藤總黃酮、總黃酮與輔料混合、壓制或調(diào)配成產(chǎn)品等幾個(gè)過程。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的補(bǔ)血中藥制劑，其劑型為口服藥物劑型的一種或幾種，一般有片劑、顆粒劑、口服液、口含片、滴丸、膠囊等。
7.根據(jù)權(quán)利要求4所述的大孔樹脂，其特征在于指AB-8、D101、HPD100、HP20等型號的大孔樹脂。
8.根據(jù)權(quán)利要求4所述的醇類，其特征在于指甲醇、乙醇、丙醇、丁醇、戊醇等低級醇。
全文摘要
本發(fā)明涉及到一種具有補(bǔ)血作用的中藥制劑及其生產(chǎn)方法，該制劑中起補(bǔ)血作用的成分是雞血藤黃酮類化合物，以雞血藤總黃酮為基礎(chǔ)，不加或只加適量的藥用輔料，按通常的制藥工藝制備而成。本發(fā)明的實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，以雞血藤總黃酮為原料制成的中藥制劑，應(yīng)用于血虛小鼠模型，顯示有較好的補(bǔ)血效果。
文檔編號A61K9/08GK1969945SQ20061016440
公開日2007年5月30日 申請日期2006年12月1日 優(yōu)先權(quán)日2006年12月1日
發(fā)明者鄧家剛, 梁寧 申請人:廣西中醫(yī)學(xué)院