離心管、離心管適配器及用于提取試樣的方法與流程

本發(fā)明涉及醫(yī)療器械領(lǐng)域，特別是涉及一種離心管及離心管適配器以及用于提取試樣的方法。

背景技術(shù)：

密度梯度離心法是指用一定的介質(zhì)在離心管內(nèi)形成連續(xù)或不連續(xù)的密度梯度，將細(xì)胞混懸液或勻漿置于介質(zhì)的頂部，通過重力或離心力場(chǎng)的作用使細(xì)胞分層、分離。目前密度梯度離心法普遍應(yīng)用于分離核酸、亞細(xì)胞器、復(fù)合蛋白質(zhì)以及其他成分。在利用密度梯度離心法分離細(xì)胞后，在提取下層細(xì)胞時(shí)，往往會(huì)受到上層成分的影響，而無法提取純凈的下層細(xì)胞。

例如，在輔助生殖技術(shù)中，對(duì)于男性精液的優(yōu)化處理是一項(xiàng)常規(guī)應(yīng)用技術(shù)。使用密度梯度離心進(jìn)行精液優(yōu)化處理，不但能夠篩選出形態(tài)及活力好的精子用于助孕治療，而且對(duì)于炎癥及傳染病患者的精液具有一定的去除微生物的作用。但是在現(xiàn)有技術(shù)中，采用常規(guī)離心管對(duì)精液進(jìn)行密度梯度離心，要提取下層優(yōu)化后的精液，通常采用兩種方法：一種是依次吸取上層精漿、梯度液丟棄，然后吸取所需要的優(yōu)化后的精液；另一種是直接使用吸管穿過上層精漿及梯度液吸取下層精液。

上述兩種方法中都存在將上層精漿混入下層優(yōu)化后的精液的風(fēng)險(xiǎn)。精液樣本是國(guó)家規(guī)定具有“生物安全二級(jí)”水平的潛在傳染源，精液樣本的感染風(fēng)險(xiǎn)與男性精囊炎癥及其攜帶的傳染性的病毒密切相關(guān)。因此，在使用密度梯度離心方法分離精液后，如何取得不受上層精漿污染的優(yōu)化精液成為目前我們亟待解決的問題。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)中存在的技術(shù)問題，本發(fā)明提供一種離心管及離心管適配器以及用于提取試樣的方法。通過本發(fā)明能夠提取密度梯度離心法分解后位于離心管本體中間部分或者底部的試樣，并且所提取的試樣不受上層試樣或者其他混合液的污染。

本發(fā)明提供一種離心管適配器，其用于配合離心管本體使用以提取經(jīng)過離心分離后位于離心管本體內(nèi)部的中間部分或底部的試樣，所述離心管適配器包括：離心管蓋體，其用于封閉所述離心管本體內(nèi)部的所述試樣；離心管過渡蓋體，所述離心管蓋體能夠安裝于所述離心管過渡蓋體，所述離心管過渡蓋體能夠安裝于所述離心管本體；吸管，其固定于所述離心管過渡蓋體并且用于提取經(jīng)過離心分離后位于所述離心管本體內(nèi)部的中間部分或底部的所述試樣。

優(yōu)選地，所述吸管延伸至所述離心管本體內(nèi)部的底部，并且用于提取所述離心管本體內(nèi)部的底部的所述試樣。

優(yōu)選地，所述吸管延伸至所述離心管本體內(nèi)部的中間部分，并且用于提取所述離心管內(nèi)部的中間部分的所述試樣。

優(yōu)選地，所述吸管的內(nèi)徑大于或等于0.25cm并且小于或等于0.5cm。

優(yōu)選地，所述離心管過渡蓋體設(shè)置有用于將所述試樣加入所述離心管本體的一個(gè)或多個(gè)通孔。

優(yōu)選地，所述離心管蓋體與所述離心管過渡蓋體通過螺紋連接或過盈配合連接；并且/或者所述離心管過渡蓋體與所述離心管本體通過螺紋連接或過盈配合連接。

優(yōu)選地，所述吸管高出所述離心管過渡蓋體的上表面。

本發(fā)明還提供一種離心管，所述離心管包括：離心管本體，其用于盛裝和離心分離試樣；以及根據(jù)本發(fā)明的離心管適配器，其能夠與所述離心管本體連接，用于從所述離心管本體內(nèi)部提取所述試樣。

優(yōu)選地，所述離心管本體為錐形離心管本體。

本發(fā)明還提供一種用于提取試樣的方法，該方法使用根據(jù)本發(fā)明的離心管提取經(jīng)過離心分離后位于離心管本體內(nèi)部的中間部分或底部的試樣，所述方法包括以下步驟：

步驟a，將固定有吸管的所述離心管過渡蓋體安裝于所述離心管本體，通過形成于所述離心管過渡蓋體的通孔向所述離心管本體內(nèi)依次加入密度梯度液和待離心試樣，

或者，先將固定有所述吸管的所述離心管過渡蓋體插入所述離心管本體，并且傾斜所述離心管過渡蓋體，從所述離心管本體的開口處依次加入密度梯度液和待離心試樣，然后將所述離心管過渡蓋體安裝于所述離心管本體；

步驟b，將所述離心管蓋體安裝于所述離心管過渡蓋體；

步驟c，將所述離心管放入離心機(jī)，在預(yù)定的離心力下離心預(yù)定的時(shí)間；

步驟d，打開所述離心管蓋體，將直徑小于所述吸管的直徑的另一吸管插入所述吸管內(nèi)，使所述另一吸管伸入所述吸管的底部以提取試樣。

本發(fā)明的離心管及離心管適配器，能夠提取密度梯度離心法分解后位于離心管本體中間部分或者底部的試樣，并且所提取的試樣不受上層試樣或者其他混合液的污染，并且本發(fā)明的離心適配器結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、通用性強(qiáng)，能夠配合常規(guī)的離心管使用。

附圖說明

圖1是現(xiàn)有的常規(guī)離心管的結(jié)構(gòu)示意圖；

圖2是根據(jù)本發(fā)明的離心管的結(jié)構(gòu)示意圖；

圖3是根據(jù)本發(fā)明的離心管的剖視圖；

圖4是根據(jù)本發(fā)明的離心管省略離心管蓋體和離心管本體的結(jié)構(gòu)示意圖；

圖5是根據(jù)圖2所示的本發(fā)明的離心管的離心管過渡蓋體的俯視圖；

圖6是根據(jù)本發(fā)明的離心管適配器的剖視圖。

附圖標(biāo)記說明

100-離心管蓋體；200-離心管過渡蓋體；210-外螺紋部；220-內(nèi)螺紋部；230-通孔；300-吸管；400-離心管本體。

具體實(shí)施方式

下面參考附圖對(duì)本發(fā)明的離心管及離心管適配器進(jìn)行詳細(xì)的描述和說明。

圖1是現(xiàn)有的常規(guī)離心管的結(jié)構(gòu)示意圖?，F(xiàn)有的常規(guī)離心管由離心管蓋體100和離心管本體400組成，在提取利用密度梯度離心法分離后的試樣時(shí)，如果所需要的試樣位于離心管本體400的底部時(shí)，只能將吸管插入離心管本體400的底部來提取，或者將上層的混合液或者其他試樣去除，才能夠提取下層所需的試樣。但是上述兩種操作方法都會(huì)引起下層試樣受到上層混合液或者其他試樣的污染的問題。

圖2是根據(jù)本發(fā)明的離心管的結(jié)構(gòu)示意圖。圖3是根據(jù)本發(fā)明的離心管的剖視圖。參考圖2和圖3，本發(fā)明的離心管包括離心管蓋體100、離心管過渡蓋體200、吸管300以及離心管本體400。如圖3所示，本實(shí)施方式中，吸管300固定于離心管過渡蓋體200，并且吸管300的上端高出離心管過渡蓋體200的上表面。這樣可以避免在向離心管本體400加入試樣和密度梯度液時(shí)，部分試樣或者密度梯度液流入吸管300內(nèi)，或者吸管300的開口處受到試樣的污染。離心管蓋體100通過螺紋旋緊于離心管過渡蓋體200，吸管300的上端和離心管蓋體100之間留有間隙。

參考圖4和圖5，離心管過渡蓋體200具有與離心管蓋體100連接的外螺紋部210和與離心管本體400連接的內(nèi)螺紋部220。從圖5中可以看出，離心管過渡蓋體200設(shè)置有兩個(gè)用于添加試樣和密度梯度液的通孔230。通過通孔230可以將試樣和密度梯度液加入離心管本體400。

如圖3所示，吸管300延伸至離心管本體400的底部，因此，通過吸管300可以直接提取離心管本體400底部的試樣，并且所提取的試樣不會(huì)受到離心管上部或者中部的其他試樣或者混合液的污染。同樣，吸管300也可以延伸至離心管本體400的其他任一位置，以提取所需要的試樣。

吸管300的內(nèi)徑優(yōu)選為大于或等于0.25cm并且小于或等于0.5cm。如果吸管300內(nèi)徑太小，由于毛細(xì)現(xiàn)象，吸管300內(nèi)會(huì)吸入大量的梯度液，從而影響試樣的提??；如果吸管300內(nèi)徑太大，則不利于試樣提取量的控制。

離心管本體400優(yōu)選為錐形管本體。這是因?yàn)?，如果在離心分離后，所要提取的樣本位于離心管本體的底部而且含量很少，錐形管本體的底部直徑小于同規(guī)格的圓柱形管本體的底部直徑，則所要提取的試樣的液面相對(duì)于同規(guī)格的圓柱形管本體的液面較高，這樣便于試樣的提取。

在本實(shí)施方式中，作為優(yōu)選，離心管蓋體100與離心管過渡蓋體200之間通過螺紋連接，離心管過渡蓋體200與離心管本體400之間也通過螺紋連接。螺紋連接牢固可靠、便于拆卸，同時(shí)也能夠避免在拆卸過程中試樣的飛濺等。

圖6為本發(fā)明的離心管適配器的剖視圖，其包括離心管蓋體100、離心管過渡蓋體200以及吸管300。吸管300固定于離心管過渡蓋體200，并且吸管300的上部高出離心管過渡蓋體200的上表面。離心管蓋體100通過螺紋旋緊于離心管過渡蓋體200，吸管300的上端和離心管蓋體100之間留有間隙。

根據(jù)本發(fā)明的離心管適配器中的離心管過渡蓋體200的外螺紋部210可以與常規(guī)離心管本體的外螺紋相同，而離心管過渡蓋體200的內(nèi)螺紋部220可以與常規(guī)離心管蓋體的內(nèi)螺紋相同，這樣，本發(fā)明的離心管適配器可以直接適用于常規(guī)的離心管。

作為本發(fā)明的優(yōu)選方案，離心管蓋體100、離心管過渡蓋體200和離心管本體400之間通過螺紋連接。但是應(yīng)當(dāng)理解，本發(fā)明中離心管蓋體100、離心管過渡蓋體200和離心管本體400之間也可以通過過盈配合的插拔式連接或者其他連接方式連接。

下面對(duì)本發(fā)明的離心管適配器在輔助生殖技術(shù)中的應(yīng)用進(jìn)行詳細(xì)的描述和說明。

通過密度梯度離心法分離精液后，優(yōu)化后的樣本精液處于離心管的底部。根據(jù)現(xiàn)有技術(shù)中常用的方法，在提取下層樣本精液時(shí)，無法避免上層精漿對(duì)所要提取的樣本精液的污染。本發(fā)明的離心管由于其具有延伸至離心管本體400底部的吸管300，可以很容易的提取底部?jī)?yōu)化后的樣本精液，同時(shí)保證所提取的樣本精液不受上層精漿的污染。

本發(fā)明的離心管在輔助生殖技術(shù)中的具體使用過程為：將本發(fā)明的離心管適配器安裝于離心管本體400，打開離心管蓋體100。將密度梯度離心液按照濃度的高低通過離心管過渡蓋體200的通孔230順序加入離心管本體400內(nèi)。然后按照比例將初始精液通過離心管過渡蓋體200的通孔230加入離心管本體400內(nèi)。此時(shí)，進(jìn)入吸管300內(nèi)部的只有密度梯度液。將離心管蓋體100旋緊于離心管過渡蓋體200。最后將離心管置于離心機(jī)內(nèi)，在300g離心力下，進(jìn)行離心20分鐘。打開離心管蓋體100，將直徑小于吸管300的另一吸管(圖中未示出)插入吸管300的底部，從吸管300的底部提取優(yōu)化后的樣本精液。當(dāng)然，也可以直接使用本發(fā)明的離心管對(duì)原始精液進(jìn)行密度梯度離心法分離。由于吸管300的下端未接觸原始精液，離心分離后，進(jìn)入吸管300內(nèi)部的只有位于吸管300上部的密度梯度液和位于吸管300下部的優(yōu)化后的樣本精液，因此所提取的樣本精液不會(huì)受到上層精槳的污染。

在上述過程中，如果離心管過渡蓋體200沒有設(shè)置通孔230，可以先將固定有吸管300的離心管過渡蓋體200插入離心管本體400，并且傾斜離心管過渡蓋體200，將密度梯度離心液按照濃度的高低從離心管本體400的開口處加入離心管本體400，然后以同樣的方法按照比例將初始精液加入離心管本體400內(nèi)進(jìn)行離心分離。

同樣的，本發(fā)明的離心管及離心管適配器，能夠應(yīng)用于別的混合液的密度梯度離心法分離技術(shù)中，如果要提取離心管本體400中間部分的試樣，只需要根據(jù)實(shí)際需求使用適當(dāng)長(zhǎng)度的吸管300即可。

在根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方式中，離心管過渡蓋體200上設(shè)置有兩個(gè)通孔，但是應(yīng)當(dāng)理解為本發(fā)明的離心管過渡蓋體200也可以設(shè)置為其他結(jié)構(gòu)，例如鏤空結(jié)構(gòu)，只要保證能夠?qū)⑽?00固定于離心管過渡蓋體200，并且具有添加試樣和密度梯度液的一個(gè)或多個(gè)通孔即可。

本發(fā)明除了能夠應(yīng)用于上述輔助生殖技術(shù)之外，同樣可以應(yīng)用于核酸、亞細(xì)胞器以及復(fù)合蛋白質(zhì)等的能夠通過密度梯度離心法分離的試樣的提取。

本發(fā)明的離心管適配器能夠配合常規(guī)的離心管使用，通用性強(qiáng)、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、使用方便。通過使用本發(fā)明的離心管或離心管適配器能夠提取離心管內(nèi)的經(jīng)過密度梯度離心法分離后位于離心管本體中間部分或者底部的試樣，而且所提取的試樣不會(huì)受到上層或者其他位置的試樣或混合液的污染。

以上所述，僅為本發(fā)明的具體實(shí)施方式，但本發(fā)明的保護(hù)范圍并不局限于此，任何熟悉本技術(shù)領(lǐng)域的技術(shù)人員在本發(fā)明所揭露的技術(shù)范圍內(nèi)，可輕易想到的變化或替換，都應(yīng)涵蓋在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。