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一種分離射干中5-羥基異黃酮類單體化合物的方法

文檔序號:3505875閱讀:286來源:國知局
專利名稱:一種分離射干中5-羥基異黃酮類單體化合物的方法
技術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明涉及天然藥物領(lǐng)域,具體涉及鳶尾科植物射干中異黃酮的分離純化領(lǐng)域, 即利用絡(luò)合高速逆流色譜從射干中分離純化高純度的單體化合物異野鳶尾黃素、野鳶尾黃 素和5,7,4'-三羥基-6,3' ,5'-三甲氧基異黃酮的方法。
背景技術(shù)
射干為鳶尾科(Iridaceae)植物射干Belamcanda chinensis (L) DC.的干燥根莖, 具有清熱解毒,消痰利咽的功效。射干中含有多種類型的天然產(chǎn)物,其中異黃酮類化合物為 其主要活性物質(zhì),具有顯著的抗炎、抗菌、抗病毒、抗癌等生物活性與藥理作用。異野鳶尾黃 素、野鳶尾黃素和5,7,4'-三羥基-6,3' ,5'-三甲氧基異黃酮是射干中的主要活性成 分。它們是同分異構(gòu)體,分離難度較大。目前,國內(nèi)外多采用常規(guī)柱色譜和重結(jié)晶等傳統(tǒng)方 法分離純化這三個目標化合物。這些方法操作繁瑣、費時費力,而且固定相對樣品有不可逆 性吸附作用,造成樣品損失嚴重。另外,由于目標化合物性質(zhì)極為接近,通常無法在較短時 間內(nèi)使其得到有效分離,需多次重復(fù)制備進行純化。高速逆、流色i普(High—speed counter current chromatography, HSCCC)是一禾中較 新的液液分配色譜技術(shù)。它不用任何固體支撐體或載體,因此克服了傳統(tǒng)分離方法對樣品 的不可逆性吸附作用,理論回收率為100%。在應(yīng)用傳統(tǒng)的HSCCC對射干中的異野鳶尾黃 素、野鳶尾黃素和5,7,4'-三羥基-6,3' ,5'-三甲氧基異黃酮進行分離時,異野鳶尾黃 素和野鳶尾黃素無法得到分離。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明公開了一種絡(luò)合高速逆流色譜法分離純化射干中異黃酮的方法,該技術(shù)具 有高效、快速,可在不改變硬件的條件下顯著改善分離效果的優(yōu)勢。射干中的主要活性成分為結(jié)構(gòu)極為近似的5-羥基異黃酮類化合物,傳統(tǒng)的分離 純化色譜技術(shù)無法在短時間內(nèi)使它們獲得較好的分離。本發(fā)明采用絡(luò)合高速逆流色譜法來 分離射干中單體化合物,獲得了良好的分離結(jié)果。發(fā)明人試圖利用傳統(tǒng)HSCCC對射干中異黃酮的單體進行分離,但由于目標化合 物性質(zhì)極為接近,很難分離,發(fā)明人通過在固定相中加入絡(luò)合劑試圖提高分離效果,研究 發(fā)現(xiàn),不同的絡(luò)合劑對射干中異黃酮分離出異野鳶尾黃素、野鳶尾黃素和5,7,4'-三羥 基_6,3' ,5'-三甲氧基異黃酮的效果是不同的。發(fā)明人采用不同的絡(luò)合劑加入固定相中對射干中上述三種單體化合物異野鳶尾 黃素(I)、野鳶尾黃素(II)和5,7,4'-三羥基-6,3',5'-三甲氧基異黃酮(III)進行 分離,結(jié)果見表1。表II、II、III在不同絡(luò)合劑中的分配系數(shù)與分離度
權(quán)利要求
1.一種采用絡(luò)合高速逆流色譜法從射干異黃酮中分離純化異野鳶尾黃素、野鳶尾黃素 和5,7,4'-三羥基-6,3' ,5'-三甲氧基異黃酮的方法,包括將石油醚乙酸乙酯甲 醇水=2. 8-3. 2 4.8-5.2 2.8-3.2 4. 8-5. 2按對應(yīng)的體積比配制兩相溶劑,上相為 流動相,下相加入絡(luò)合劑硝酸銅為固定相,將射干異黃酮溶于上相中,從尾端往高速逆流色 譜儀中泵入固定相,待管路充分充滿固定相后轉(zhuǎn)動主機,同時泵入流動相,接收目標成分。
2.權(quán)利要求1的方法,其中泵入固定相的流速為lOmL/min。
3.權(quán)利要求1的方法,其中絡(luò)合高速逆流色譜的溶劑系統(tǒng)中硝酸銅的濃度為0.05mol/ L-0. 15mol/L。
4.權(quán)利要求1的方法,其中主機轉(zhuǎn)速為800-900rpm。
5.權(quán)利要求1的方法,其中流動相泵入速度為0.8-2. OmL/min。
6.權(quán)利要求1的方法,其中射干異黃酮是將射干經(jīng)乙醇提取,CH2Cl2萃取,過ODS柱后 得到。
全文摘要
本發(fā)明涉及天然藥物領(lǐng)域,具體涉及鳶尾科植物射干中5-羥基異黃酮類單體化合物的分離純化領(lǐng)域,其特征是利用絡(luò)合高速逆流色譜從射干中分離純化高純度的單體化合物異野鳶尾黃素、野鳶尾黃素和5,7,4′-三羥基-6,3′,5′-三甲氧基異黃酮的方法,所用的絡(luò)合劑為硝酸銅。本發(fā)明的分離方法簡單快速,具有分離效率高、產(chǎn)品純度好的優(yōu)點。
文檔編號C07D311/40GK102127047SQ20111000365
公開日2011年7月20日 申請日期2011年1月10日 優(yōu)先權(quán)日2011年1月10日
發(fā)明者劉偉娜, 孔令義, 羅建光 申請人:中國藥科大學
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