專利名稱：動物用快速藥敏試紙的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及藥敏試紙的制備方法，尤其涉及一種動物用快速藥敏試紙的制備方法。
目前，國內(nèi)絕大多數(shù)食用畜禽都是采用集約化圈養(yǎng)和籠養(yǎng)方式飼養(yǎng)，防疫治病已成為畜禽飼養(yǎng)過程中最重要的問題。近年來，由于在畜牧業(yè)養(yǎng)殖中抗菌藥物的濫用，耐藥菌株也隨之大大增加，如雞大腸桿菌病、雞白痢、慢性呼吸道病、葡萄球菌病和綠膿桿菌病及仔豬黃痢、白痢等疾病，因耐藥性的產(chǎn)生，同時(shí)因養(yǎng)殖戶缺乏對有效抗菌藥物選擇的正確判斷，在使用中盲目給藥現(xiàn)象相當(dāng)普遍。這種現(xiàn)象造成的主要后果是1.畜牧養(yǎng)殖戶增加了不必要的經(jīng)濟(jì)損失；2.增加畜禽的耐藥性，使防治成本上升；3.抗菌藥物在畜禽動物體內(nèi)超標(biāo)殘留嚴(yán)重，人們食用后對人體有相當(dāng)?shù)膿p害作用。為了解決上述問題，一些高校及科研機(jī)構(gòu)在實(shí)驗(yàn)室里采用鋼圈法等研究方法進(jìn)行了藥敏試驗(yàn)，但這些方法制備煩瑣，使用條件苛刻，無法解決廣大養(yǎng)殖戶面臨的實(shí)際問題。
本發(fā)明的目的就是為了克服上述現(xiàn)有技術(shù)存在的缺陷而提供一種能快速、準(zhǔn)確地判斷動物體內(nèi)致病菌對抗菌藥物敏感性的動物用快速藥敏試紙的制備方法。
本發(fā)明的目的可以通過以下技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn)動物用快速藥敏試紙的制備方法，其特點(diǎn)是，包括滅菌濾紙片的制備、藥品溶液的制備、藥敏試紙的制備的工藝過程，其具體工藝步驟如下第一步，滅菌濾紙片的制備A.取原型定性濾紙，將它加工成直徑4～8mm雙面帶有文字標(biāo)記的濾紙片，稱量分裝到西林瓶中，每瓶100～150張；B.將分裝后的濾紙片在100～140℃下干熱滅菌1～2小時(shí)；第二步藥品溶液的制備根據(jù)致病菌對抗菌藥物的敏感性及血液中的藥物濃度，將抗菌藥物經(jīng)過稱量、溶解、定容、稀釋配成一定濃度的溶液。
第三步，藥敏試紙的制備A.用吸管將配置好的藥液加到已滅菌的濾紙片上，每100張加藥液0.5～0.8毫升，完全浸透后取出，在37～40℃下烘干20～24小時(shí)；B.在無菌環(huán)境中將已烘干的藥敏試紙置入藥瓶中，用蠟封口密封；C.將藥瓶貼上標(biāo)簽并進(jìn)行外包裝，4～10℃下保存?zhèn)溆谩?br> 所述的抗菌藥物選自以下藥物中的一種，這些藥物包括A.青霉素鈉鹽1000～2000iu/ml；B.氨芐青霉素鈉2～4mg/ml；C.硫酸鏈霉素200～300iu/ml；D.硫酸卡那霉素0.2～0.4mg/ml；E.硫酸慶大霉素100～300iu/ml；F.硫酸丁胺卡那霉素0.05～0.1mg/ml；G.硫酸新霉素0.06～0.15mg/ml；H.乳糖酸紅霉素0.2～0.4mg/ml；I.氯霉素0.3～0.6mg/ml；J.利高霉素0.4～0.8mg/ml；K.鹽酸強(qiáng)力霉素1～2mg/ml；L.鹽酸環(huán)丙沙星0.3～0.6mg/ml；M.鹽酸恩諾殺星0.3～0.6mg/ml；N.煙酸諾氟殺星0.3～0.6mg/ml；O.鹽酸林可霉素0.3～0.6mg/ml；P.磺胺類4～8mg/ml；G.氧氟沙星0.3～0.5mg/ml；R.桿菌肽鋅0.1～0.3mg/ml；S.硫酸粘桿菌素0.2～0.4mg/ml；T.延胡索酸泰妙菌素0.05～0.1mg/ml。
通過實(shí)施上述技術(shù)方案，使本發(fā)明獲得了一種能快速、準(zhǔn)確地判斷的物體內(nèi)致病菌的藥敏試紙，它把只有在相當(dāng)技術(shù)和物質(zhì)條件下才能進(jìn)行的、復(fù)雜的藥敏試驗(yàn)過程，簡化成一般養(yǎng)殖戶都能掌握的快速、簡便的測試方法。本發(fā)明操作簡單、使用方便、結(jié)果準(zhǔn)確、費(fèi)用低廉，適用于養(yǎng)殖生產(chǎn)上各種動物感染性的疾病中致病菌對抗菌藥物敏感性的測定，使用本發(fā)明產(chǎn)品進(jìn)行測試，減少了盲目、超量、亂用藥帶來的損失，降低了畜禽產(chǎn)品藥物殘留的危害，為合理用藥提供最直接的依據(jù)。
下面通過具體實(shí)施例，對本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)說明。
實(shí)施例1本實(shí)施例為一種動物體內(nèi)致病菌對青霉素鈉鹽敏感的藥敏試紙的制備方法。它分為以下工藝步驟第一步，濾紙片的制備，首先取原型定性濾紙，采用噴印技術(shù)將它加工成雙面帶有“青霉素鈉鹽”的標(biāo)記的直徑為6mm的濾紙小圓片，稱量分裝到西林瓶中，每瓶100張，然后在120℃下干熱滅菌2小時(shí)；第二步，藥品溶液的制備，稱取青霉素鈉鹽的標(biāo)準(zhǔn)品8×104IU，加少量磷酸緩沖液將藥品溶解后，置入50ml定量瓶中定容，然后將它稀釋到1600IU/ml；第三步，藥敏試紙的制備，首先用吸管將配置好的青霉素鈉鹽藥液加到上述已滅菌的濾紙片上，每100張加藥液0.6ml，完全浸透后取出，在38℃下烘干24小時(shí)，然后在滅菌環(huán)境中將已烘干的藥敏試紙置入藥瓶中，用蠟封口密封，最后在藥瓶上貼上標(biāo)有青霉素鈉鹽的字樣后進(jìn)行外包裝，置入冰箱，在4～10℃下保存?zhèn)溆谩?br> 本發(fā)明制得的藥敏試紙一般要結(jié)合測定用培養(yǎng)基、測定用器皿一起使用，為使養(yǎng)殖戶使用方便，也可以將藥敏試紙、培養(yǎng)基、測定器皿裝在一個(gè)包裝盒內(nèi)。下面分別介紹一下它們的制備方法(1)測定用培養(yǎng)基的制備，培養(yǎng)基分為普通營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基、血清營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基和馬鈴薯瓊脂培養(yǎng)基，培養(yǎng)基一般是置于培養(yǎng)基皿中，培養(yǎng)基的制備又可分為以下幾步，首先購得標(biāo)準(zhǔn)營養(yǎng)瓊脂產(chǎn)品，然后進(jìn)行溶解、加熱，再在消毒環(huán)境中均勻置于培養(yǎng)基皿中冷卻定型，如有特殊要求，可加入附加物質(zhì)，如血清等，最后裝入滅菌包裝袋后密封，置入包裝盒。(2)測定用器皿的制備，測定用器皿包括玻棒、吸管、瓶塞等，要求在醫(yī)藥管理部門定點(diǎn)的醫(yī)藥玻璃制品廠、橡膠制品廠和塑料制品廠選購，這些器皿經(jīng)清洗后滅菌、干燥，并在滅菌環(huán)境中組合包裝，置入包裝盒。(3)藥敏試紙測定包裝盒的制備，取一個(gè)具有一定容積的盒體，依次裝入藥敏試紙、培養(yǎng)基皿、測試器皿以及使用說明書等，外盒封閉后即完成。
為了更加清楚地說明本發(fā)明，下面簡述一下依本發(fā)明制得的藥敏試紙盒的使用方法。
1.取出培養(yǎng)基盒，取其中一袋培養(yǎng)基皿拆封；2.接種致病菌，將可疑的致病菌接種到已做好的平皿培養(yǎng)基上；3.藥敏試紙的放置，接種細(xì)菌后，從瓶中取出藥敏試紙置于皿上，每皿最多可均勻放置藥敏試紙7張；4.培養(yǎng)，將已放置藥敏試紙的平皿培養(yǎng)基在37℃的恒溫箱中培養(yǎng)24小時(shí)；5.觀察判定，判定標(biāo)準(zhǔn)
各種致病菌對不同的抗菌藥物的敏感性不同，同一致病菌的不同菌株對不同抗菌藥物的敏感性也有差異。分離致病菌經(jīng)培養(yǎng)后，使用不同藥物的藥敏試紙對菌群進(jìn)行敏感測驗(yàn)，以肉眼可明顯觀察到的抑菌現(xiàn)象，做出菌群對不同抗菌藥物的殺傷敏感性的判斷，據(jù)此藥敏試紙測定的結(jié)果可提供一個(gè)快速合理的給藥方案，提高療效，降低用藥成本，為養(yǎng)殖業(yè)中預(yù)防和治療感染性疾病找到了一條可靠而科學(xué)的途徑。
實(shí)施例2本實(shí)施例為動物體內(nèi)致病菌對氨芐青霉素鈉敏感的藥敏試紙的制備方法。它包括以下工藝步驟首先取加工成直徑為4mm的濾紙片在100℃下干熱滅菌2小時(shí)，然后取濃度為2mg/ml的氨芐青霉素鈉加到已滅菌的濾紙片上，每100張加0.5ml，完全浸透后取出，在37℃下烘干20小時(shí)；最后在滅菌環(huán)境中將已烘干的藥敏試紙置入藥瓶中蠟封備用。其余有關(guān)工藝與實(shí)施例1相同。
實(shí)施例3
本實(shí)施例為動物體內(nèi)致病菌對硫酸鏈霉素敏感的藥敏試紙的制備方法。它包括以下工藝步驟首先取加工成直徑為8mm的濾紙片在140℃下干熱滅菌1小時(shí)，然后取濃度為250iu/ml的硫酸鏈霉素加到已滅菌的濾紙片上，每100張加0.8ml，完全浸透后取出，在40℃下烘干24小時(shí)；最后在滅菌環(huán)境中將已烘干的藥敏試紙置入藥瓶中蠟封備用。其余有關(guān)工藝與實(shí)施例1相同。
實(shí)施例4～20以下實(shí)施例為動物體內(nèi)致病菌分別對硫酸卡那霉素等17種抗菌藥物敏感的藥敏試紙的制備方法。
其使用的抗菌藥物及其濃度如下表所示
將上述的抗菌藥物加到已滅菌的濾紙片上，其余工藝與實(shí)施例1相同。
權(quán)利要求
1.動物用快速藥敏試紙的制備方法，其特征在于，包括滅菌濾紙片的制備、藥品溶液的制備、藥敏試紙的制備的工藝過程，其具體工藝步驟如下第一步，滅菌濾紙片的制備A.取原型定性濾紙，將它加工成直徑4～8mm雙面帶有文字標(biāo)記的濾紙片，稱量分裝到西林瓶中，每瓶100～150張；B.將分裝后的濾紙片在100～140℃下干熱滅菌1～2小時(shí)；第二步藥品溶液的制備根據(jù)致病菌對抗菌藥物的敏感性及血液中的藥物濃度，將抗菌藥物經(jīng)過稱量、溶解、定容、稀釋配成一定濃度的溶液。第三步，藥敏試紙的制備A.用吸管將配置好的藥液加到已滅菌的濾紙片上，每100張加藥液0.5～0.8毫升，完全浸透后取出，在37～40℃下烘干20～24小時(shí)；B.在無菌環(huán)境中將已烘干的藥敏試紙置入藥瓶中，用蠟封口密封；C.將藥瓶貼上標(biāo)簽并進(jìn)行外包裝，4～10℃下保存?zhèn)溆谩?br> 2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的動物用快速藥敏試紙的制備方法，其特征在于，所述的抗菌藥物選自以下藥物中的一種，這些藥物包括A.青霉素鈉鹽1000～2000iu/ml；B.氨芐青霉素鈉2～4mg/ml；C.硫酸鏈霉素200～300iu/mlD.硫酸卡那霉素0.2～0.4mg/ml；E.硫酸慶大霉素100～300iu/ml；F.硫酸丁胺卡那霉素0.05～0.1mg/ml；G.硫酸新霉素0.06～0.15mg/ml；H.乳糖酸紅霉素0.2～0.4mg/ml；I.氯霉素0.3～0.6mg/ml；J.利高霉素0.4～0.8mg/ml；K.鹽酸強(qiáng)力霉素1～2mg/ml；L.鹽酸環(huán)丙沙星0.3～0.6mg/ml；M.鹽酸恩諾殺星0.3～0.6mg/ml；N.煙酸諾氟殺星0.3～0.6mg/ml；O.鹽酸林可霉素0.3～0.6mg/ml；P.磺胺類4～8mg/ml；G.氧氟沙星0.3～0.5mg/ml；R.桿菌肽鋅0.1～0.3mg/ml；S.硫酸粘桿菌素0.2～0.4mg/ml；T.延胡索酸泰妙菌素0.05～0.1mg/ml。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種動物用快速藥敏試紙的制備方法,它包括制備滅菌濾紙片、配制藥品溶液、制備藥敏試紙等工藝步驟。與現(xiàn)有技術(shù)相比,本發(fā)明工藝簡單,成本較低,使用本發(fā)明產(chǎn)品進(jìn)行測試,操作方便、結(jié)果準(zhǔn)確,減少了盲目、超量、亂用藥帶來的經(jīng)濟(jì)損失,降低了畜禽產(chǎn)品藥物殘留對人體的危害,為合理用藥提供了最直接的依據(jù)。
文檔編號C12Q1/04GK1357633SQ0012770
公開日2002年7月10日 申請日期2000年12月5日 優(yōu)先權(quán)日2000年12月5日
發(fā)明者葉紅麗 申請人:上海高龍生物科技有限公司