專利名稱：骨碎補/豬骨粉/殼聚糖復合支架材料制備方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種制備帶藥組織工程支架材料的方法，而且該材料為全天然的組織
工程支架材料，適用于骨組織損傷的修復及作為骨組織工程細胞支架。
背景技術：
作為骨修復材料的同種骨有來源局限性、采骨量有限、必須開辟第2術區(qū)給病人 帶來一定的痛苦的缺點。異體骨有傳播疾病的危險且臨床供應有限。人工合成材料有較好 的骨傳導性與一定的機械強度，但它的骨傳導性較好，誘導性較差。組織工程化骨由于一些 技術問題，很大部分工作目前仍停留在試驗階段，不易開展，臨床應用仍需慎重。自從1668 年荷蘭人Job van Meekeren報道了第一例異種骨移植術，他將狗的顱骨移植到傷員的顱骨 缺損處，當后來傷員要求取出移植物時，顱骨缺損已部分修復。自此異種骨開始被人們所 重視并得到廣泛的研究。異種骨修復材料具有來源廣泛，易操作，移植時顯示出良好的骨傳 導性和生物相容性，不用開辟多余手術，病人損傷小等優(yōu)點，但是異種骨同時又存在免疫排 斥、疾病交叉?zhèn)魅镜葐栴}，使異種骨的應用受到限制。經(jīng)過衍生化(脫鈣、深低溫冷凍、煮 沸、Y射線輻照、化學脫蛋白)的異種骨可以消除抗原性，也能較好地保持原有的骨傳導甚 至骨誘導性，是較好擴大的骨源，但衍生骨加工成型困難，有時強度會受到影響。
基于合成的羥基磷灰石生產(chǎn)原料價格高及需要高溫、高壓生產(chǎn)條件，目前造價很 高，而天然羥基磷灰石是利用豬骨頭提取的，生產(chǎn)成本低，原材料來源豐富，價格低廉，生產(chǎn) 工藝簡單，不需特殊的設備，綠色環(huán)保，無"三廢"排放。由于牛和豬的骨骼結構與人的較為 相似，是理想的骨替代材料。但牛骨有瘋牛病等交叉感染的危險，所以選用豬骨型羥基磷灰 石作為支架材料的研究對象。 殼聚糖[(1，4)-2-氨基-2-脫氧-e-D-葡聚糖]是由甲殼素經(jīng)化學改性得到的 有廣泛應用價值的天然生物多糖高分子材料。由于殼聚糖具有眾多優(yōu)點無毒性、生物可降 解、生物活性、生物相容性和抗菌性等，另外，有研究表明殼聚糖能促進凝血，促進生長因子 TGF-P 1的釋放，從而加快傷口愈合的作用，因此廣泛應用于生物醫(yī)學中。殼聚糖作為生物 醫(yī)用材料吸水性強，形成的纖維或膜材料的濕態(tài)機械強度差，提高其機械性能，對其在生物 醫(yī)藥領域的應用有重要意義。研究殼聚糖復合材料目的就是保持殼聚糖所特有的優(yōu)異性 能，而且能得到殼聚糖單純使用時所沒有的綜合性能。 中藥骨碎補為水龍骨科多年生蕨類植物槲蕨Dr. ynaria fortunei (Kunze) J. Sm的 干燥根莖。始載于唐《本草拾遺》，味苦，溫，歸肝經(jīng)、腎經(jīng)，具有補腎，活血，止血，續(xù)傷之功 效，主治腎虛腰痛、腳弱、耳鳴耳聾、牙痛、久瀉、跌仆閃挫或金瘡、損傷筋骨，為歷代常用藥 物。骨碎補具有補肝腎強筋骨的傳統(tǒng)功效，而且經(jīng)過實驗證明了骨碎補的提取液的確能促 進成骨細胞的增殖。 因此，本發(fā)明將骨碎補/豬骨粉(豬骨型羥基磷灰石)/殼聚糖通過真空冷凍干燥 法復合制備理想的骨組織工程支架材料。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供一種能提高組織工程支架材料力學性能、降解過程pH值穩(wěn)定、生產(chǎn)成 本低且骨修復性能更好的骨碎補/豬骨粉(豬骨型羥基磷灰石)/殼聚糖復合組織工程支 架材料的制備方法。 本發(fā)明的目的是鑒于復合材料中各個組分雖然保持其相對獨立性，但其性質卻不 是各個組分性能的簡單加和，而是在保持各個組分材料的某些特點的基礎上，具有組分間 協(xié)同作用產(chǎn)生的綜合性能?？蓮浹a單一材料的缺點，可產(chǎn)生單一材料所不具備的新特性。所 以為了克服異種骨的的缺點并得到生物活性更優(yōu)異的支架材料，現(xiàn)制備出中藥骨碎補/豬 骨粉(豬骨型羥基磷灰石)/殼聚糖復合支架材料。該支架材料孔隙率和抗壓強度相匹配， 在降解過程pH值穩(wěn)定，生物活性優(yōu)異，生產(chǎn)成本低且骨修復性能更好。因此，該復合支架材 料在具有以上特點后，可作為骨組織缺損修復材料和骨組織工程細胞支架材料，以滿足新 一代生物材料發(fā)展的需要。 本發(fā)明解決技術問題所采用的方案是以殼聚糖為模板，復合豬骨型羥基磷灰石
和中藥骨碎補制備支架材料，采用真空冷凍干燥法作為成型技術。
本發(fā)明具有如下特征 (1)該支架材料是由中藥骨碎補、豬骨粉(豬骨型羥基磷灰石)和殼聚糖三種材料 復合而成 (2)該支架材料中的中藥骨碎補是由骨碎補粉和提取骨碎補有效成分即骨碎補液 的形式加入的； (3)骨碎補粉的制備粉碎方法為首先把骨碎補粉碎為小顆粒，然后用行星球磨 機球磨3小時，之后用瑪瑙研缽研磨，過200目篩子之后裝袋備用； (4)水提取骨碎補液的制備將生品骨碎補于8(TC干燥，加水浸泡lh，直火煎煮， 保持微沸50min (注意保持提取液的體積)，用脫脂棉過濾，再加水復提2次，過濾，合并藥 液，在水浴上蒸發(fā)以得到5ml的濃溶液；噴霧霧制粉；
(5)豬骨型羥基磷灰石的制備步驟如下 ①前處理異種骨除去抗原性成分前，需要先加工成一定形狀和大小的骨塊。用小
刀刮去豬骨軟組織和骨膜，鋸去兩端骨松質，用塑料密封，入-151:冰箱中保持一天以上。冰 凍狀態(tài)下鋸成20 X 10mm2 (長邊為骨軸向)的骨±央，表面用蒸餾水沖洗干凈，置冰箱中備用， 之后將豬骨砸碎。 ②脫脂采用500ml球形Soxhlet提取器，異種(豬)骨放入提取器的萃取腔中，
將適量甲醇和氯仿按體積比為l : 1加入提取器，另加約占甲醇/氯仿總體積10%的水，加
足量沸石或玻璃珠等顆粒，加熱形成甲醇 氯仿脫脂溶劑的回流，冷凝下來的不含脂肪的
新鮮脫脂溶劑不斷流過骨塊，骨塊中的脂肪等可溶于脫脂溶劑的成分逐步溶入溶劑中并沉
積于提取器底部容器。脫脂溶劑中添加10%的水以溶出一些非脂成分，底部燒瓶保持65
7(TC以維持溶劑回流。豬股骨密質骨塊經(jīng)前處理、脫脂一定時間后取出，于空氣中吹干脫脂
溶劑，再入放有硅膠的真空干燥器中真空放置24小時以上以除去殘余的溶劑。 ③脫鈣將脫脂后除去殘余溶劑的豬骨用0. 3mol/L的HC1脫鈣5分鐘，再用蒸餾
水沖洗干凈后干燥。 ④煅燒處理取出脫脂脫鈣后的異種骨將其置于熱處理爐里，按條件進行煅燒，獲得85(TC煅燒2小時的骨條。將煅燒后的異種骨粉碎，選用研缽進行手工研磨并通過200目 篩子，再用行星球磨機進行球磨3個小時，以得到煅燒的異種骨粉。 (6)該支架材料中的殼聚糖是以殼聚糖溶液的形式加入的，由于殼聚糖不溶于水， 一般采用1% 2%的醋酸溶液使其溶解。 (7)為提高支架材料的力學性能分別對豬骨型羥基磷灰石和殼聚糖進行改性，其 具體內(nèi)容如下 ①采用硅烷偶聯(lián)劑(KH-570)對豬骨型羥基磷灰石進行改性，硅烷偶聯(lián)劑 (KH-570)的用量為豬骨型羥基磷灰石的lwt%。 ②用螯合型焦磷酸鈦酸酯偶聯(lián)劑(NDZ-311)對殼聚糖進行改性，螯合型焦磷酸鈦 酸酯偶聯(lián)劑(NDZ-311)的用量為殼聚糖的lwt%。 (8)制備該支架材料采用真空冷凍干燥法成型，其制備方法如下 首先用螯合型焦磷酸鈦酸酯偶聯(lián)劑(NDZ-311)對殼聚糖進行改性，磁力攪拌兩小
時后，將豬骨型羥基磷灰石和骨碎補(粉體或溶劑)倒入殼聚糖溶液中，再磁力攪拌四小時
后，用玻璃棒攪拌均勻，使其達到均勻分散，得到粘稠溶液。將溶液倒入模具里，然后放到冰
箱中-85t:預冷24小時左右，再取出后立即放入真空冷凍干燥箱中，在真空狀態(tài)下低溫干
燥48個小時。然后取出即得到復合多孔支架材料； (9)支架材料的孔隙率在45X 91X之間、孔徑在40iim 500iim范圍內(nèi)可調， 而且孔連通性較好； (10)該支架材料的抗壓強度可達0. lMPa 5. 6MPa ; (11)該支架在降解過程中pH值穩(wěn)定，中藥骨碎補(粉)/豬骨粉(豬骨型羥基磷 灰石)/殼聚糖復合支架材料周圍體液的PH值在6. 77 7. 50之間，中藥骨碎補(溶劑)/ 豬骨粉(豬骨型羥基磷灰石)/殼聚糖復合支架材料周圍體液的PH值在6. 82 7. 42之 間； (12)本材料中加入了骨碎補，在植入前期具有很好促進骨細胞形成能力和骨結合 程度高特點； (13)結合豬骨型羥基磷灰石和殼聚糖的各自的優(yōu)點_即同時擁有羥基磷灰石良 好生物相容性，引導骨形成、骨融合的特性和和殼聚糖的體內(nèi)降解吸收，高強度、抗菌抗癌 和良好的骨整合等特殊的醫(yī)用生物學特性。同時互補各自的一些自身無法克服的缺點一即 羥基磷灰石不易聚居碎裂特性，多孔材料機械強度差，不可吸收和殼聚糖不能單獨用于骨 缺損修復等缺點； (14)并且鑒于骨碎補總黃酮可以促進骨生成的特性，該復合材料具有良好的組織
相容性，良好的機械學特性，可以漸進性吸收，長期植入體內(nèi)由于殼聚糖的吸收，允許骨組
織長入殼聚糖吸收后留下的位點并和羥基磷灰石交錯交聯(lián)骨整合在一起。 本發(fā)明由中藥骨碎補、豬骨粉(豬骨型羥基磷灰石)和殼聚糖三種材料復合而成，
獲得一種能提高組織工程支架材料力學性能、降解過程PH值穩(wěn)定、生產(chǎn)成本低且骨修復性
能更好的骨組織缺損修復材料和骨組織工程用細胞支架材料。 本發(fā)明中所用的殼聚糖是以粉末的形式加入的。 本發(fā)明中所用的豬骨粉即天然羥基磷灰石是從豬骨頭中提取的。 本發(fā)明中骨碎補粉的加入量為豬骨型羥基磷灰石和殼聚糖總質量的1/10，骨碎補劑的加入量為每1克殼聚糖加入骨碎補濃溶劑5ml。 本發(fā)明中殼聚糖的加入量為天然羥基磷灰石和殼聚糖總質量的10wt% 50wt%之間。 本發(fā)明是分別采用硅烷偶聯(lián)劑(KH-570)和螯合型焦磷酸鈦酸酯偶聯(lián)劑
(NDZ-311)對豬骨型羥基磷灰石和殼聚糖進行改性，以提高支架材料的力學性能。 本發(fā)明的中藥骨碎補/豬骨粉(豬骨型羥基磷灰石)/殼聚糖復合支架材料可用
于骨組織缺損修復材料和骨組織工程用細胞支架材料。


下面結合附圖和分析測試方法對本發(fā)明進一步說明，可以更好的理解本發(fā)明所述的支架結構和性能。 圖1是中藥骨碎補/豬骨型羥基磷灰石/殼聚糖復合支架材料(改變殼聚糖含量)X200斷面SEM的組織和形貌觀察的圖片。 其中(a)殼聚糖(50wt% ) ， (b)殼聚糖(40wt% ) ， (c)殼聚糖(30wt% ) ， (d)殼聚糖(20wt% ) ， (e)殼聚糖(10wt% )。 圖2是中藥骨碎補/豬骨型羥基磷灰石/殼聚糖復合支架材料(改變殼聚糖含量)X2000斷面SEM的組織和形貌觀察的圖片。 其中(a)殼聚糖(50wt% ) ， (b)殼聚糖(40wt% ) ， (c)殼聚糖(30wt% ) ， (d)殼聚糖(20wt% ) ， (e)殼聚糖(10wt% )。 圖3是中藥骨碎補/豬骨型羥基磷灰石/殼聚糖復合支架材料(改變殼聚糖含量)孔隙率的變化曲線。 其中橫坐標為殼聚糖的含量/%，縱坐標為平均孔隙率/%。 圖4是中藥骨碎補/豬骨型羥基磷灰石/殼聚糖復合支架材料(改變殼聚糖含量)抗壓強度的變化曲線。 其中橫坐標為殼聚糖的含量/% ，縱坐標為抗壓強度/MPa。 圖5是中藥骨碎補/豬骨型羥基磷灰石/殼聚糖復合支架材料在模擬體液中降解時的pH值變化曲線。 其中橫坐標為小時h，縱坐標為pH值。以及圖線說明C、D、G、F、E分別為豬骨型羥
基磷灰石cs為5 : 5、6 : 4、7 : 3、8 : 2、9 : i比例的中藥骨碎補(粉)/豬骨粉(豬
骨型羥基磷灰石)/殼聚糖復合支架材料的pH值變化曲線，B為豬骨型羥基磷灰石cs為8 : 2的中藥骨碎補(溶劑)/豬骨粉(豬骨型羥基磷灰石)/殼聚糖復合支架材料的pH值
變化曲線。 具體分析 如圖1-圖2所示隨著殼聚糖含量的增加，支架材料的孔的大小和數(shù)量是逐漸增加的，也就是引導細胞逐步粘連的"橋"增加了。在斷面200倍下觀察到，試樣孔結構以CS為模板呈板條搭錯層疊狀。而且隨著殼聚糖含量由10wt^增加到50wt^，孔徑也由40i!m變化到500 ii m左右。在斷面2000倍下可以更清晰地觀察到，豬骨型HA顆粒均勻地分散在CS模板上，CS孔壁光滑，豬骨型HA顆粒尺寸在1 y m以內(nèi)。 如圖3所示隨著殼聚糖含量的增加，骨碎補/豬骨型HA/殼聚糖復合支架的孔隙率是逐漸變大的。但是只有當殼聚糖的含量達到20wt^以上，才能達到支架材料對孔隙率的要求。 如圖4所示隨著殼聚糖含量的增加，骨碎補/豬骨型HA/殼聚糖復合支架的抗壓強度是逐漸降低的。而且只有當殼聚糖的含量達到20wt^以上，才能達到支架材料對抗壓強度的要求。 如圖5所示該支架材料在降解過程中pH值穩(wěn)定，中藥骨碎補(粉)/豬骨粉(豬骨型羥基磷灰石)/殼聚糖復合支架材料周圍體液的pH值在6. 77 7. 50之間(殼聚糖的含量為20wt% )，中藥骨碎補(溶劑)/豬骨粉(豬骨型羥基磷灰石)/殼聚糖復合支架材料周圍體液的pH值在6. 82 7. 42之間(殼聚糖的含量為20wt% )。
具體實施例方式
由以下詳盡的實施例來描述本發(fā)明的優(yōu)異特點和效果，但并不是對本發(fā)明做任何限制。 實施例1 :中藥骨碎補(粉)/豬骨粉(豬骨型羥基磷灰石)/殼聚糖復合支架材料的制備(改變殼聚糖的含量) 首先把豬骨經(jīng)過前處理、脫脂、脫鈣、煅燒、球磨制得豬骨粉(豬骨型羥基磷灰石)，而且把骨碎補粉碎為小顆粒，然后用行星球磨機球磨3小時，之后用瑪瑙研缽研磨，過200目篩子之后裝袋備用，之后是殼聚糖的溶解，殼聚糖采用2%的醋酸溶液使其溶解。然后用螯合型焦磷酸鈦酸酯偶聯(lián)劑(NDZ-311)對殼聚糖進行改性，螯合型焦磷酸鈦酸酯偶聯(lián)劑(NDZ-311)的用量為殼聚糖的lwt^，磁力攪拌兩小時后，將豬骨型羥基磷灰石和骨碎補(用量為豬骨型羥基磷灰石和CS總量的1/10)的混粉(按豬骨型羥基磷灰石CS為
5 : 5、6 : 4、7 : 3、8 : 2、9 : i的比例)分別倒入殼聚糖溶液中，再磁力攪拌四小時后，
用玻璃棒攪拌均勻，使其達到均勻分散，得到粘稠溶液。將溶液倒入模具里，然后放到冰箱
中-85t:預冷24小時左右，再取出后立即放入低溫冷凍箱中，在真空狀態(tài)下低溫干燥48個
小時，然后取出即得到復合多孔支架材料。通過改變殼聚糖的含量得到的支架材料的孔隙
率在45 % 91 %之間、孔徑在40 ii m 500 ii m范圍內(nèi)可調，而且孔連通性較好。 實施例2 :中藥骨碎補(粉)/豬骨粉(豬骨型羥基磷灰石)/殼聚糖復合支架材
料的制備 首先用螯合型焦磷酸鈦酸酯偶聯(lián)劑(NDZ-311)對殼聚糖進行改性，螯合型焦磷酸鈦酸酯偶聯(lián)劑(NDZ-311)的用量為殼聚糖的lwt^，磁力攪拌兩小時后，將豬骨型羥基磷灰石和骨碎補(用量為豬骨型羥基磷灰石和CS總量的1/10)的混粉按豬骨型羥基磷灰
石cs為8 : 2的比例倒入殼聚糖溶液中，再磁力攪拌四小時后，用玻璃棒攪拌均勻，使
其達到均勻分散，得到粘稠溶液。將溶液倒入模具里，然后放到冰箱中_851:預冷24小時左右，再取出后立即放入低溫冷凍箱中，在真空狀態(tài)下低溫干燥48個小時。然后取出即得到復合多孔支架材料。此時所制得的支架材料的孔隙率為80.8%，抗壓強度為1.5MPa，其孔隙率和抗壓強度相匹配。通過模擬體液試驗證實該支架材料在降解過程中pH值穩(wěn)定，中藥骨碎補(粉)/豬骨粉(豬骨型羥基磷灰石)/殼聚糖復合支架材料周圍體液的pH值在6. 77 7. 50之間。 實施例3:中藥骨碎補(溶劑)/豬骨粉(豬骨型羥基磷灰石)/殼聚糖復合支架材料的制備 首先把豬骨經(jīng)過前處理、脫脂、脫鈣、煅燒、球磨制得豬骨粉(豬骨型羥基磷灰 石)，而且把骨碎補粉碎為小顆粒，然后用行星球磨機球磨3小時，之后用瑪瑙研缽研磨， 過200目篩子之后裝袋備用，之后是殼聚糖的溶解。然后用螯合型焦磷酸鈦酸酯偶聯(lián)劑 (NDZ-311)對殼聚糖進行改性，螯合型焦磷酸鈦酸酯偶聯(lián)劑(NDZ-311)的用量為殼聚糖的 lwt^，磁力攪拌兩小時后，將豬骨型羥基磷灰石按豬骨型羥基磷灰石CS為8 : 2的比例 倒入殼聚糖溶液中，再加入骨碎補劑的濃溶液，再磁力攪拌得到粘稠溶液。將溶液倒入模具 里，然后放到冰箱中_85°〇預冷24小時左右，再取出后立即放入低溫冷凍箱中，在真空狀態(tài) 下低溫干燥48個小時。然后取出即得到復合多孔材料。此時所制得的支架材料的孔隙率為 78. 1%，抗壓強度為1. lMPa，其孔隙率和抗壓強度相匹配，通過模擬體液試驗證實該支架材 料能提高骨修復的速度，材料在降解過程中pH值穩(wěn)定，中藥骨碎補(溶劑)/豬骨粉(豬骨 型羥基磷灰石)/殼聚糖復合支架材料周圍體液的PH值在6. 82 7. 42之間。
權利要求
一種帶藥骨碎補/豬骨粉(豬骨型羥基磷灰石)/殼聚糖復合組織工程支架材料的制備方法，其特征在于(1)該支架材料是由中藥骨碎補、豬骨粉(豬骨型羥基磷灰石)和殼聚糖三種材料復合而成(2)該支架材料中的中藥骨碎補是由骨碎補粉和提取骨碎補有效成分即骨碎補液的形式加入的，由于骨碎補的加入克服現(xiàn)有組織工程支架植入初期骨組織生長較慢，初期骨結合弱的缺點，該材料的骨修復性能更好；(3)該支架材料應用的是豬骨頭提取的豬骨型羥基磷灰石，綠色無毒，無三廢排放，生產(chǎn)成本低；(4)支架材料的孔隙率在45％～91％之間、孔徑在40μm～500μm范圍內(nèi)可調，而且孔連通性較好；(5)該支架材料的抗壓強度可達0.1MPa～5.6MPa；(6)該支架在降解過程中pH值穩(wěn)定，中藥骨碎補(粉)/豬骨粉(豬骨型羥基磷灰石)/殼聚糖復合支架材料周圍體液的pH值在6.77～7.50之間，中藥骨碎補(溶劑)/豬骨粉(豬骨型羥基磷灰石)/殼聚糖復合支架材料周圍體液的pH值在6.82～7.42之間；
2. 根據(jù)權利要求l所述的骨碎補/豬骨粉(豬骨型羥基磷灰石)/殼聚糖復合組織工程 支架材料，其特征在于(l)骨碎補粉的制備球磨機球磨；(2)水提取骨碎補液的制備(3) 噴霧制粉。
3. 根據(jù)權利要求1所述的骨碎補/豬骨粉(豬骨型羥基磷灰石)/殼聚糖復合組織工 程支架材料，其特征在于豬骨粉是由豬骨經(jīng)過前處理、脫脂、脫鈣、煅燒、球磨制得豬骨粉 (豬骨型羥基磷灰石)。
4. 根據(jù)權利要求1所述的骨碎補/豬骨粉(豬骨型羥基磷灰石)/殼聚糖復合組 織工程支架材料，其特征在于采用硅烷偶聯(lián)劑(KH-570)和螯合型焦磷酸鈦酸酯偶聯(lián)劑 (NDZ-311)分別對豬骨型羥基磷灰石和殼聚糖進行修飾以提高支架材料的力學性能。
5. 根據(jù)權利要求1所述的骨碎補/豬骨粉(豬骨型羥基磷灰石)/殼聚糖復合組織工 程支架材料，其特征在于采用真空冷凍干燥法作為成型技術。
6. 根據(jù)權利要求1所述的骨碎補/豬骨粉(豬骨型羥基磷灰石)/殼聚糖復合組織工 程支架材料可用于骨組織缺損修復材料和骨組織工程用細胞支架材料。
全文摘要
本發(fā)明采用全天然材料制備帶藥組織工程支架材料的一種方法，克服現(xiàn)有組織工程支架植入初期骨組織生長較慢，初期骨結合弱的缺點，支架中引入中藥骨碎補和豬骨型羥基磷灰石，得到生物活性優(yōu)異的復合組織工程支架材料。豬骨型羥基磷灰石是從豬骨頭中提取，生物活性優(yōu)異，綠色無毒，生產(chǎn)成本低，破碎達到微米-納米化；中藥骨碎補具有促進成骨細胞的增殖，加速骨生長、消炎抗菌作用，采用水提有效溶劑法-破碎法-噴霧制備；以殼聚糖為模板，采用真空冷凍干燥法制備。支架材料的孔隙率在45％～91％之間、孔徑在40μm～500μm范圍內(nèi)可調，抗壓強度可達0.1MPa～5.6MPa。該支架在降解過程中pH值在6.77～7.50之間。
文檔編號A61L27/20GK101721744SQ20081013729
公開日2010年6月9日 申請日期2008年10月13日 優(yōu)先權日2008年10月13日
發(fā)明者李慕勤, 王晶彥, 王靜 申請人:佳木斯大學