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雞胡須性狀的基因型快速鑒定方法與流程

文檔序號:11126257閱讀:來源:國知局

技術(shù)特征:

1.用于鑒別雞胡須性狀基因型的PCR引物組合,其特征在于,包括:

正向引物F1:5'-TGGTTGTGTGCCAAGTAGAG-3';

正向引物F2:5'-GCTCTTGCTCTTTTTGGTAA-3';以及

反向引物R:5'-CTTTTCGTACTGCGTTGTTA-3'。

2.含有權(quán)利要求1所述引物組合的用于鑒別雞胡須性狀基因型的試劑盒。

3.雞胡須性狀的基因型快速鑒定方法,其特征在于,包括以下步驟:

1)提取待測雞的基因組DNA;

2)以步驟1)中提取的DNA為模板,利用權(quán)利要求1所述引物組合,進行PCR擴增反應(yīng);

3)分析PCR產(chǎn)物。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法,其特征在于,PCR反應(yīng)體系以20μl計為:

5.根據(jù)權(quán)利要求3或4所述的方法,其特征在于,PCR反應(yīng)條件為:95℃5分鐘;95℃30秒,53℃30秒,72℃20秒,共27個循環(huán);72℃7分鐘。

6.根據(jù)權(quán)利要求3-5項所述的方法,其特征在于,步驟3)分析PCR產(chǎn)物的方法如下:

將PCR擴增產(chǎn)物進行2%瓊脂糖凝膠電泳檢測,溴化乙錠染色,凝膠成像系統(tǒng)中觀察PCR擴增條帶,并拍照;

用Image J軟件分析電泳膠圖,計算每個泳道中296bp條帶和207bp條帶的亮度值,并計算207bp條帶亮度值與296bp條帶亮度值的比值P;P值在0.7-0.9之間判定為胡須雞基因純合子,P值在0.2-0.5之間判定為胡須雞雜合子;P值為0,只擴增出296bp條帶,則判定為非胡須雞個體。

7.與雞胡須性狀相關(guān)的特異性分子標(biāo)記,其特征在于,所述分子標(biāo)記是位于雞27號染色體上CNV1下游,大小為207bp的DNA片段,用于擴增所述分子標(biāo)記的引物為:

正向引物F1:5'-TGGTTGTGTGCCAAGTAGAG-3'和

反向引物R:5'-CTTTTCGTACTGCGTTGTTA-3'。

8.權(quán)利要求7所述特異性分子標(biāo)記在鑒定胡須雞品種中的應(yīng)用。

9.權(quán)利要求7所述特異性分子標(biāo)記在雞分子標(biāo)記輔助育種中的應(yīng)用。

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